親和色譜也稱為親和層析,是一種利用固定相的結(jié)合特性來分離分子的色譜方法。親和色譜在凝膠過濾色譜柱上連接與待分離的物質(zhì)有一定結(jié)合能力的分子,并且它們的結(jié)合是可逆的,在改變流動(dòng)相條件時(shí)二者還能相互分離。親和色譜可以用來從混合物中純化或濃縮某一分子,也可以用來去除或減少混合物中某一分子的含量。
親和色譜的一般流程
親和色譜分離的通常是混合在溶液中的物質(zhì),比如細(xì)胞內(nèi)容物、培養(yǎng)基或血漿等。待分離的分子在通過色譜柱時(shí)被固定相或介質(zhì)上的基團(tuán)捕獲,而溶液中其他的物質(zhì)可以順利通過色譜柱。然后把固態(tài)的基質(zhì)取出后洗脫,目標(biāo)分子即刻被洗脫下來。如果分離的目的是去除溶液中某種分子,那么只要分子能與介質(zhì)結(jié)合即可,可以不必進(jìn)行洗脫(這里有沒有什么問題呢?如果不進(jìn)行洗脫的話,柱子不能再生,沒有實(shí)際應(yīng)用價(jià)值吧,柱子多貴)。
親和色譜的應(yīng)用
親和色譜的用途很廣泛,可以用來從細(xì)胞提取物中分離純化核酸、蛋白,還可以從血漿中分離抗體。分離重組蛋白就經(jīng)常使用親和色譜。通過基因修飾為蛋白加上一些人為的特性,這些特性使蛋白選擇性地與配體結(jié)合,從而達(dá)到分離的目的。親和色譜的另一大用途是從血漿中分離抗體。
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