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有機合成TLC顯色劑及使用方法2017-06-01

1.通用顯色劑

 

①硫酸常用的有四種溶液:硫酸-水(1:1)溶液;硫酸-甲醇或乙醇(1:1)溶液;1.5mol/L硫酸溶液與0.5-1.5mol/L硫酸銨溶液,噴后110℃烤15min,不同有機化合物顯不同顏色。

②0.5%碘的氯仿溶液 對很多化合物顯黃棕色。

③中性0.05%高錳酸鉀溶液 易還原性化合物在淡紅背景上顯黃色。

④堿性高錳酸鉀試劑 還原性化合物在淡紅色背景上顯黃色。

溶液I:1%高錳酸鉀溶液;溶液Ⅱ:5%碳酸鈉溶液;溶液I和溶液Ⅱ等量混合應用。

⑤酸性高錳酸鉀試劑 噴1.6%高錳酸鉀濃硫酸溶液(溶解時注意防止爆炸),噴后薄層于180℃加熱15~20min。

⑥酸性重鉻酸鉀試劑 噴5%重鉻酸鉀濃硫酸溶液,必要時150℃烤薄層。

⑦5%磷鉬酸乙醇溶液 噴后120℃烘烤,還原性化合物顯藍色,再用氨氣薰,則背景變為無色。

⑧鐵氰化鉀-三氯化鐵試劑 還原性物質顯藍色,再噴2mol/L鹽酸溶液,則藍色加深。

溶液I:1%鐵氰化鉀溶液;溶液Ⅱ:2%三氯化鐵溶液;臨用前將溶液I和溶液Ⅱ等量混合。

 

2.專屬性顯色劑

由于化合物種類繁多,因此專屬性顯色劑也是很多的,現將在各類化合物中最常用的顯色劑列舉如下:

 

(1)烴類

①硝酸銀/過氧化氫

檢出物:鹵代烴類。

溶液:硝酸銀0.1g溶于水lml,加2-苯氧基乙醇lOOml,用丙酮稀釋至200ml,再加30%過氧化氫1滴。

方法:噴后置未過濾的紫外光下照射;

結果:斑點呈暗黑色。

 

②熒光素/溴

檢出物:不飽和烴。

溶液:I.熒光素0.1g溶于乙醇lOOml;Ⅱ.5%溴的四氯化碳溶液。

方法:先噴(I),然后置含溴蒸氣容器內,熒光素轉變為四溴熒光素(曙紅),熒光消失,不飽和烴斑點由于溴的加成,阻止生成曙紅而保留熒光,多數不飽和烴在粉紅色背景上呈黃色。

 

③四氯鄰苯二甲酸酐

檢出物:芳香烴。

溶液:2%四氯鄰苯二甲酸酐的丙酮與氯代苯(10:1)的溶液。

方法:噴后置紫外光下觀察。

 

④甲醛/硫酸

檢出物:多環芳烴。

溶液:37%甲醛溶液O.2ml溶于濃硫酸l0ml。

 

(2)醇類

①3,5一二硝基苯酰氯

檢出物:醇類。

溶液:I.2%本品甲苯溶液;Ⅱ.0.5%氫氧化鈉溶液;Ⅲ.O.002%羅丹明溶液。

方法:先噴(I),在空氣中干燥過夜,用蒸氣薰2min,將紙或薄層通過試液(Ⅱ)30s,噴水洗,趁濕通過(Ⅲ)15s,空氣干燥,紫外燈下觀察。

 

②硝酸鈰銨

檢出物:醇類。

溶液:I.1%硝酸鈰銨的0.2mol/L硝酸溶液;Ⅱ.N,N-二甲基-對苯二胺鹽酸鹽1.5g溶于甲醇、水與乙酸(128m1+25m1+1.5m1)混合液中,用前將(I)與(Ⅱ)等量混合。噴板后于105oC加熱5min。

 

③香草醛/硫酸

檢出物:高級醇、酚、甾類及精油。

溶液:香草醛1g溶于硫酸lOOml。

方法:噴后于120oC加熱至呈色最深。

 

④二苯基苦基偕肼 ’

檢出物:醇類、萜烯、羰基、酯與醚類。

溶液:本品15mg溶于氯仿25ml中。

方法:噴后于110oC加熱5~lOmin。

結果:紫色背景呈黃色斑點。

 

(3)醛酮類

①品紅/亞硫酸

檢出物:醛基化合物。

溶液:I.0.01%品紅溶液,通入二氧化硫直至無色;Ⅱ.0.05mol/L氯化汞溶液;

Ⅲ.O.05mol/L硫酸溶液。

方法:將I、Ⅱ、Ⅲ以1:1:10混合,用水稀釋至l00ml。

 

②鄰聯茴香胺

檢出物:醛類、酮類。

溶液:本品乙酸飽和溶液。

 

③2,4-二硝基苯肼

檢出物:醛基、酮基及酮糖。

溶液:I.0.4%本品的2mol/L鹽酸溶液; Ⅱ.本品O.1g溶于乙醇l00ml中,加濃鹽酸lml。

方法:噴溶液I或Ⅱ后,立即噴鐵氰化鉀的2mol/L鹽酸溶液。

結果:飽和酮立即呈藍色;飽和醛反應慢,呈橄欖綠色;不飽和羰基化合物不顯色。

 

④繞丹寧

檢出物:類胡蘿卜素醛類。

溶液:I.1%~5%繞丹寧乙醇溶液;Ⅱ.25%氫氧化銨或27%氫氧化鈉溶液。

方法:先噴溶液I,再噴溶液Ⅱ,干燥。

 

(4)有機酸類

①溴甲酚綠

檢出物:有機酸類。

溶液:溴甲酚綠0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氫氧化鈉溶液5ml。

方法:浸板。

結果:藍色背景產生黃色斑點。

 

②高錳酸鉀/硫酸

檢出物:脂肪酸衍生物。

溶液:見通用顯色劑酸性高錳酸鉀。

 

③過氧化氫

檢出物:芳香酸。

溶液:0.3%過氧化氫溶液。

方法:噴后置紫外光(365nm)下觀察。

結果:呈強藍色熒光。

 

④2,6-二氯苯酚-靛酚鈉

檢出物:有機酸與酮酸。

溶液:0.1%本品的乙醇溶液。

方法:噴后微溫。

結果:藍色背景呈紅色。

 

(5)酚類

①Emerson 試劑(4-氨基安替比林/鐵氰化鉀(Ⅲ))

檢出物:酚類、芳香胺類及揮發油。

溶液:I.4-氨基安替比林1g溶于乙醇100ml;Ⅱ.鐵氰化鉀(Ⅲ)4g溶于水50ml,用乙醇稀釋至100ml。

方法:先噴溶液I,在熱空氣中干燥5min,再噴溶液Ⅱ,再于熱空氣中干燥5min,然后將板置含有氨蒸氣(25%氨溶液)的密閉容器中。

結果:斑點呈橙-淡紅色。揮發油在亮黃色背景下呈紅色斑點。

 

②Boute 反應

檢出物:酚類、氯、溴、烷基代酚。

方法:將薄層置有NO2蒸氣(含濃硝酸)的容器中3~10min,再用NH2蒸氣(濃氨液)處理。

 

③氯醌(四氯代對苯醌)

檢出物:酚類。

溶液:1%本品的甲苯溶液。

 

④DDQ(二氯二氰基苯醌)試劑

檢出物:酚類。

溶液:2%本品的甲苯溶液。

 

⑤TCNE (四氰基乙烯)試劑

檢出物:酚類、芳香碳氫化物、雜環類、芳香胺類。

溶液:0.5%~1%本品的甲苯溶液。

⑥Gibb’s(2,6-二溴苯醌氯亞胺)試劑

檢出物:酚類。

溶液:2%本品的甲醇溶液。

 

⑦氯化鐵

檢出物:酚類、羥酰胺酸。

溶液:1%~5%氯化鐵的0.5mol/L鹽酸溶液。

結果:酚類呈藍色、羥酰胺酸呈紅色。

 

(6)含氮化合物

①FCNP(硝普鈉/鐵氰化物)試劑

檢出物:脂 肪族含氮化物,如氨基氰、胍、脲與硫脲及其衍生物,肌酸及肌酐。

溶液:10%氫氧化鈉溶液、10%硝普鈉溶液、10%鐵氰化鉀溶液與水按1:1:1:3混合,在室溫至少放置20min,冰箱保存數周,用前將混合液與丙酮等體積混合。

 

②Dragendorff(碘化鉍鉀試劑)試劑

檢出物:芳香族含氮化合物,如生物堿類、抗心律不齊藥物。

溶液:I.堿式硝酸鉍0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中;Ⅱ.碘化鉀8g溶于水20ml中。

將上述溶液I及Ⅱ等量混合,置棕色瓶中作為儲備液,用前取儲備液lml、冰醋酸2ml與水l0ml混合。

結果:呈橘紅色斑點。

 

③4-甲基傘形酮

檢出物:含氮雜環化合物。

溶液:本品0.02g溶于乙醇35ml,加水至100ml。

方法:噴板后置25%氨水蒸氣的容器中,取出后于紫外燈(365nm)下觀察。

 

④碘鉑酸鉀

檢出物:生物堿類及有機含氮化物。

溶液:10%六氯鉑酸溶液3ml與水97ml混合,加6%碘化鉀溶液,混勻。臨用前配制。

 

⑤硫酸高鈰銨/硫酸

檢出物:生物堿及含碘有機化物。

溶液:硫酸鈰1g混懸于4ml水中,加三氯乙酸1g,煮沸,逐滴加入濃硫酸直至混濁消失。

方法:噴后薄層于1l0oC加熱數分鐘。

結果:阿樸嗎啡、馬錢子堿、秋水仙堿、罌粟堿、毒扁豆堿與有機碘化物均能檢出。

 

⑥Ehrlich (對二甲氨基苯甲醛/鹽酸)試劑

檢出物:吲哚衍生物及胺類。

溶液:1%本品的濃鹽酸溶液與甲醇按1:1混合。

方法:噴后板于50oC加熱20min。

結果:呈不同顏色的斑點。

 

(7)胺類

①硝酸/乙醇

檢出物:脂肪族胺類。

溶液:50滴65%硝酸于乙醇100ml中。

方法:需要時120oC加熱。

 

②2,6-二氯醌氯亞胺

檢出物:抗氧劑、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氫化物、藥物、苯氧基乙酸除草劑等。

溶液:新鮮制備的0.5%~2%本品乙醇溶液。

方法:噴后薄層于110oC加熱10min,再用氨蒸氣處理。

 

③茜素

檢出物:胺類。

溶液:O.1%本品的乙醇溶液。

 

④丁二酮單肟/氯化鎳

檢出物:胺類。

溶液:I.丁二酮單肟1.2g溶于熱水35ml中,加氯化鎳0.95g,冷卻后加濃氨水2ml;

Ⅱ.鹽酸羥胺0.12g溶于200ml水中。

方法:將溶液I及Ⅱ混合,放置1天,過濾。

 

⑤Pauly (對氨基苯磺酸)試劑

檢出物:酚類、胺類和能偶合的雜環化合物。

溶液:磺酸4.5g溶于溫熱的12mol/L鹽酸45ml中,用水稀釋至500ml,取lOml于冰中冷卻,加4.5%亞硝酸鈉冷溶液lOml,于OoC放置15min。用前加等體積10%碳酸鈉溶液。

 

⑥硫氰酸鈷(Ⅱ).

檢出物:生物堿、伯、仲、叔胺類。

溶液:硫氰酸銨3g與氯化鈷1g溶于水20ml。

結果:白色至粉紅色背景上呈藍色斑點,2h后顏色消退。若將薄層噴水或放入飽和水蒸氣容器內,可重現色點。

 

⑦1,2-萘醌-4-磺酸鈉

檢出物:芳香胺類。

溶液:本品0.5g溶于95ml水,加乙酸5ml,濾去不溶物即得。

方法:噴后反應30min顯色。

 

⑧葡萄糖/磷酸

檢出物:芳香胺類。

溶液:葡萄糖2g溶于85%磷酸l0ml與水40ml混合液中,再加乙醇與正丁醇各30ml。

方法:噴后于115℃加熱l0min。

 

(8)硝基及亞硝基化合物

①α-萘胺

檢出物:3,5一二硝基苯甲酸酯、二硝基苯甲酰胺。

溶液:I.O.5%α-萘胺乙醇溶液;

Ⅱ.10%氫氧化鉀甲醇溶液。

方法:先噴溶液I,再噴溶液Ⅱ。

結果:呈紅褐色斑點。

②二苯胺/氯化鈀

檢出物:亞硝胺類。

溶液:1.5%二苯胺乙醇溶液與0.1g氯化鈀的0.2%氯化鈉溶液lOOml,按5:1混合。

方法: 噴后置紫外光(254nm)下觀察。

結果:顯紫色斑點。

 

(9)氨基酸及肽類

①茚三酮

檢出物:氨基酸、胺與氨基糖類。

溶液:本品O.2g溶于乙醇l00ml中。

方法:噴后于110oC加熱。

結果:呈紅紫色斑點。

 

②茚三酮/乙酸鎘

檢出物:氨基酸及雜環胺類。

溶液:茚三酮1g及乙酸鎘2.5g溶于l0ml冰醋酸中,用乙醇稀釋至500ml。

方法:噴后于120oC加熱20min。

 

③1,2-萘醌-4-磺酸鈉

檢出物:氨基酸。

溶液:臨用前將本品O.02g溶于5%碳酸鈉l00ml中。

方法:噴后室溫干燥。

結果:不同氨基酸呈不同色點。

 

④靛紅/乙酸鋅

檢出物:氨基酸與某些肽類。

溶液:靛紅1g與乙酸鋅1g溶于95%異丙醇l00ml中,加熱至80oC,冷卻后加乙酸1ml,冰箱保存。

方法:噴后于80~85″C加熱30min。

 

⑤茚三酮/冰醋酸

檢出物:二肽及三肽。

溶液:1%茚三酮吡啶溶液與冰醋酸按5:1混合。

方法:噴后于l00oC加熱5min。

 

⑥香草醛

檢出物:氨基酸及胺類。

溶液:I.本品1g溶于丙醇50ml中;

Ⅱ.1mol/L氫氧化鉀溶液lml,用乙醇稀釋至lOOml。

方法:先噴溶液I后于110oC干燥l0min,再噴溶液Ⅱ,于110oC再干燥l0min,于紫外光(365nm)下觀察。

 

(10)甾類

①香草醛/硫酸

檢出物:甾體激素。

溶液:1%香草醛濃硫酸溶液。

方法:噴后于105℃加熱5min。

 

②氯化錳

檢出物:雌激素類。

溶液:氯化錳0.2g溶于含硫酸2ml的甲醇60ml中。

方法:噴后置紫外光(365nm)下觀察。

 

③高氯酸

檢出物:甾體激素。

溶液:5%高氯酸甲醇溶液。

方法:噴后于110oC加熱5min,置紫外光(365nm)下觀察。

 

④三氯化銻/乙酸

檢出物:甾類與二萜類。

溶液:三氯化銻20g溶于乙酸20ml與氯仿60ml混合液中。

方法:噴后于100oC加熱5min,紫外光長波下觀察。

結果:二萜類斑點呈紅黃-藍紫色。

 

⑤對甲苯磺酸

檢出物:甾族化合物、黃酮類與兒茶酸類。

溶液:20%本品的氯仿溶液。

方法:噴后于100oC加熱數分鐘,紫外光長波下觀察。

結果:斑點呈熒光。

 

⑥氯磺酸/乙酸

檢出物:三萜、甾醇與甾族化合物。

溶液:氯磺酸5ml在冷卻下加乙酸l0ml溶解。

方法:噴后于130oC加熱5~l0min,置紫外光長波下觀察。

結果;斑點顯熒光。

 

(11)糖類

①茴香胺、鄰苯二酸試劑

檢出物:碳氫化合物。

溶液:1.23g茴香胺及1.66g鄰苯二酸于l00ml 95%乙醇中的溶液。

方法:噴霧或浸漬。

結果:己糖呈綠色、甲基戊糖呈黃綠色、戊糖呈紫色、糖醛酸呈棕色。

 

②四乙酸鉛/2,7一二氯熒光素

檢出物:甙類、酚類、糖酸類

溶液:I.2%四乙酸鉛的冰醋酸溶液;Ⅱ.1%2,7一二氯熒光素乙醇溶液。

取溶液I、Ⅱ?各5ml混勻,用干燥的苯或甲苯稀釋至200ml,試劑溶液只能穩定2h。

方法:浸板。

 

③鄰氨基聯苯/磷酸

檢出物:糖類。

溶液:O.3g鄰氨基聯苯加85%磷酸5ml與乙醇95ml。

方法:噴板后llOoC加熱15~20min。

結果:斑點呈褐色。

 

④苯胺/二苯胺/磷酸

檢出物:還原糖。

溶液:4g二苯胺、4ml苯胺與20ml 85%磷酸共溶于200ml丙酮中。

方法:噴后于85℃加熱l0min。

結果:產生各種顏色。1,4-己醛糖、低聚糖呈藍色。

 

⑤雙甲酮/磷酸

檢出物:酮糖。

溶液:雙甲酮(5,5-二甲基環己烷-1,3-二酮)10.3g溶于90ml乙醇與l0ml 85%磷酸中。

方法:噴板后于110oC加熱15~20min。

結果:日光下觀察,白色背景上呈黃色斑點,紫外光長波下呈藍色熒光。

 

⑥聯苯胺/三氯乙酸

檢出物:糖類。

溶液:0.5g聯苯胺溶于l0ml乙酸,再加10ml40%三氯乙酸水溶液,用乙醇稀釋至l00ml。

方法:噴后置紫外光下照射15min。

結果:斑點呈灰棕-紅褐色。

 

⑦對二甲氨基苯甲醛/乙酰丙酮

檢出物:氨基糖類。

溶液:I. 5ml 50%氫氧化鉀溶液與20ml乙醇混勻,取此溶液0.5ml,加乙酰丙酮0.5ml與正丁醇50ml的混合液l0ml,此兩種溶液均需新鮮配制,臨用前混合;

Ⅱ. 1g對二甲氨基苯甲醛溶于30ml乙醇中,再加30ml濃鹽酸,需要時此溶液可用正丁醇180ml稀釋。

方法:先噴I后于105oC加熱5min,再噴Ⅱ,然后于90℃干燥5min。

結果:斑點呈紅色。

 

 

 

 

 

 

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